雙光束紫外可見分光光度計是依據(jù)物質(zhì)在紫外、可見光區(qū)的吸收光譜特性和朗伯-比爾定律的原理,對物質(zhì)進行定性定量分析的儀器&,器廣泛應用于石油’醫(yī)藥、化工、衛(wèi)生防疫等部門。為確保儀器出具數(shù)據(jù)準確可靠,必須經(jīng)過計量
部門的周期檢定,對使用頻率高對儀器技術(shù)指標要求高的部門,要經(jīng)常對儀器進行校準。
1、雙光速紫外可見分光光度計使用過程要經(jīng)常進行基線校正:對儀器進行各項校準前一定要校準基線。不同的儀器操作不同,有的是點“baseline”有的是點“zero”還有其他操作方法。
2、基線平直度的測量:做完“校準基線”后即測量此項指標。要想得出準確的結(jié)果,條件設定很關(guān)鍵,選擇光度計的“波長掃描”功能,波長范圍:全波段;帶寬:2nm;掃描速度:中速;縱坐標范圍的設定也很重要,單位選擇“透射比”,可設定為95%-105%或98%-102%,以便清晰看出100%線的變化。
3、波長準確度與重復性的測量:目前國際上使用的標準有汞燈、氧化鈥溶液或氧化鈥濾光片,這些標準都有較豐富的光譜峰,選用儀器的“波長掃描”功能,宜用掃描速度慢,相應時間小,這樣可以避免附加誤差。要特別注意“采樣間隔”的設定,為了準確得出峰值波長的數(shù)據(jù),宜采用“0.1nm”但有的無法設定“采樣間隔”,“波長范圍”的起始波長與終止波長相隔不超過200nm才能得出準確的峰值數(shù)據(jù),想要把氧化鈥濾光片的特征峰235-640nm掃描一遍,要分三段設定。大部分儀器可以直接設定所要的“采樣間隔”
4、透視比準確度和重復性的測量:操作上使用儀器的“定量測量”功能,用戶使用儀器的該項功能較多,盡量選用“多波長測量”。為保證測量準確,應正確使用標準溶液:
1)對測量用吸收池的要求,采用光徑長度為10.00mm的石英池盛裝標準溶液,吸收池的兩透光面應無劃痕、油漬或液體污染,否則會產(chǎn)生一些散射光甚至熒光干擾測量,安裝吸收池至樣品框架上應遵循一定的方向,可按吸收池箭頭所標方向正對入射光方向,以減少吸收池兩透光面的不平行性帶來的誤差。
2)必須事先對儀器波長進行校準后,才能使用標準溶液測量透射比準確度。